Разработка диагностикума эритроцитарного шигеллезного Флекснера VI

О.Ю. Кузнецова, В.Н. Вербов, В.Л. Львов.
Кафедра молекулярной биотехнологии, e-mail: olgakuznetsova994@gmail.com.

Ежегодно общее число случаев шигеллезов в мире оценивается в 165 млн. Почти 69 % всех случаев заболевания и 61 % всех летальных исходов приходится на группу детей младше 5 лет. Серологические методы подтверждения дизентерии являются ускоренными методами диагностики. Один из таких методов - реакция пассивной гемагглютинации (РПГА) [1].

Цель работы заключалась в разработке эритроцитарного О-антигенного диагностикума для выявления специфических антител к шигеллам Флекснера VI.

Диагностикум был получен путем сенсибилизации акролеинизированных эритроцитов кур хроматографически очищенным липополисахаридным О-антигеном шигелл Флекснера VI в 0,01 М фосфатном буферном растворе, рН — 7,2 ± 0,2 (ФБР). Приготовление раствора антигена осуществлялось 2 методами, позволяющими повысить его сенсибилизирующую активность:

  1. растворение навески сухого антигена в ФБР с последующей дробной стерилизацией в автоклаве текучим паром при 100 °С, давлении 0,9 атм. по 30 мин. в течение 3 дней;
  2. растворение навески сухого антигена в 8 М растворе мочевины с последующим нагреванием в кипящей воде до полного растворения хлопьев антигена.

Специфическая активность диагностикумов, полученных из различным образом активированных антигенов, определялась методом РПГА с использованием 2 сывороток.

  1. Сыворотка диагностическая шигеллезная Флекснера VI адсорбированная сухая для РА «Агнолла» в разведении 1:10 (С.-Петербургский НИИВС).
  2. Сыворотка диагностическая шигеллезная Флекснера VI неадсорбированная сухая из набора реагентов «Диагностикум эритроцитарный шигеллезный Флекснера VI антигенный», в разведении 1:100 (С.-Петербургский НИИВС).

Титры сывороток при постановке с обоими диагностикумами совпали (1:1280 и 1:6400 соответственно). Это позволяет ввести в технологический процесс изготовления диагностикума активацию антигена 8 М раствором мочевины.

Литература

  1. Руководство по инфекционным болезням. (Под ред. проф. Ю.В. Лобзина и проф. К.В. Жданова). Том I. СПб: Фолиант, 2011. 664 с.

Все публикации

ФБУН НИИ эпидемиологии
и микробиологии имени Пастера
Отдел новых технологий