Набор для экспресс-определения бета-лактамазы

Назначение набора для экспресс-определения бета-лактамазы

Набор реагентов предназначен для экспрессного определения в течение 5 - 7 мин бета-лактамазы (пенициллиназы) бактерий Staphylococcus spp., Haemophilus influenzae, Neisseria meningitides, Neisseria gonorrhoeae, которая разрушает природные пенициллины, ампициллин, амоксициллин. Набор для экспресс-определения бета-лактамазы рассчитан на проведение 200 анализов.

Принцип метода набора для экспресс-определения бета-лактамазы

После смешивания исследуемого штамма с фиксированным количеством бензилпенициллина и индикаторной системой (йод-крахмал) происходит следующее. Если штамм продуцирует бета-лактамазу, то происходит разрушение бензилпенициллина, продукты распада которого связывают йод из индикаторного комплекса и обесцвечивают его. Если штамм не обладает способностью продуцировать бета-лактамазу, то йод остается в составе индикаторного комплекса синего цвета.

Состав набора для экспресс-определения бета-лактамазы

  • Раствор йода с йодистым калием, 10 мл - 4 фл.
  • Бензилпенициллин (натриевая или калиевая соль), 500 000 ЕД - 4 фл.
  • Крахмал растворимый, 0,2 г - 4 пр.
  • Полоска фильтровальная (2х2 см) - 210 шт.
  • Инструкция по применению - 1 шт.

Подготовка реактивов к использованию набора для экспресс-определения бета-лактамазы

Реактив № 1.

В бактериологическую пробирку вносят 0,2 г растворимого крахмала (содержимое одной пробирки), добавляют 10 мл дистиллированной воды, растворяют при нагревании до кипения. Хранить при температуре от 2 до 10 °С. Срок годности - 7 дней.

Реактив № 2.

Во флакон с 500 000 ЕД бензилпенициллина вносят 10 мл раствора йода с йодистым калием (содержимое одного флакона), встряхивают. Реактив должен иметь желтовато-коричневатую окраску. Срок годности - 2 ч при температуре не выше 22 °С.

Проведение анализа на базе набора для экспресс-определения бета-лактамазы

Полоски фильтровальной бумаги помещают на чашку Петри или предметное стекло. Наносят на каждую полоску 1 - 2 капли реактива № 1. Полоски увлажняются и прилипают к стеклу или пластику, однако полоски не должны содержать избытка жидкости на поверхности. В центры полосок наносят петлей суточные агаровые культуры исследуемых бактерий в виде "бляшек" диаметром 4 - 5 мм. Затем на "бляшки" наносят по 1 - 2 капли реактива № 2, в результате чего поверхность "бляшек" и полосок приобретает темно-синюю окраску.

Контроли (по одному в день исследования): отрицательный контроль - штамм Staphylococcus aureus заведомо отрицательный по бета-лактамазе; положительный контроль - штамм Staphylococcus aureus заведомо положительный по бета-лактамазе.

Учет и интерпретация результатов на базе набора для экспресс-определения бета-лактамазы

Результаты исследования учитывают через 5 - 7 мин экспозиции при температуре не выше 22 °С. Положительный результат (наличие бета-лактамазы) - появление зоны полного обесцвечивания полоски вокруг "бляшки" бактерий на темно-синем фоне полоски. Отрицательный результат (отсутствие бета-лактамазы) - отсутствие зоны обесцвечивания вокруг "бляшки" бактерий на темно-синем фоне полоски.

Выявление бета-лактамазы бактерий Staphylococcus spp., Haemophilus influenzae, Neisseria meningitides, Neisseria gonorrhoeae указывает на их устойчивость к природным пенициллинам, ампициллину, амоксициллину.

Условия хранения и транспортировки набора для экспресс-определения бета-лактамазы

  • Набор для экспресс-определения бета-лактамазы хранить плотно закрытым, в темном сухом месте при температуре не выше 8 °С. Транспортировку набора для экспресс-определения бета-лактамазы осуществлять всеми видами крытого транспорта при температуре не выше 30 °С не более 2 недель.
  • Срок годности набора для экспресс-определения бета-лактамазы - 1 год.

Главная ::  Каталог "Диски с антибиотиками" ::  Список инструкций

ФБУН НИИ эпидемиологии
и микробиологии имени Пастера
Отдел новых технологий